Kërkimet mbi bakteret kërkojnë punë të përpiktë me pajisje dhe instrumente të shumta. Në mënyrë që mikroorganizmat të shumohen sa më shpejt në kushte laboratorike dhe të jenë në gjendje të mbajnë aktivitetin normal jetësor, përdoren mjete të posaçme ushqyese. Përbërja e tyre dhe kushtet biofizike janë të përshtatshme për rritjen aktive të një kulture bakteriale.
Medium ushqyes. Mikrobiologjia dhe aplikime të tjera
Kolonitë bakteriale rriten në laborator në enët Petri të mbushura me përmbajtje pelte ose gjysmë të lëngshme. Këto janë mjedise ushqyese, përbërja dhe vetitë e të cilave janë sa më afër atyre natyrale për rritjen cilësore të të korrave.
Mjedise të tilla përdoren në kërkimet mikrobiologjike dhe në laboratorët diagnostikues mjekësorë. Këta të fundit punojnë më shpesh me njolla të baktereve patogjene ose oportuniste, pozicioni sistematik i të cilave përcaktohet drejtpërdrejt në institucion.
Natyrale dhe sintetikee mërkurë
Rregulli bazë i punës me bakteret është zgjedhja e saktë e mediumit ushqyes. Ai duhet të plotësojë kritere të shumta, duke përfshirë përmbajtjen e elementeve mikro dhe makro, enzimat, një vlerë konstante të aciditetit, presionin osmotik, madje edhe përqindjen e oksigjenit në ajër.
Mjetet ushqyese klasifikohen në dy grupe të mëdha:
- Mjediset natyrore. Përzierje të tilla përgatiten nga përbërës natyralë. Ky mund të jetë uji i lumit, pjesët e bimëve, plehrat organike, perimet, indet bimore dhe shtazore, maja etj. Mjedise të tilla karakterizohen nga një përmbajtje e lartë kimikatesh natyrore, shumëllojshmëria e të cilave nxit rritjen e kulturës bakteriale. Pavarësisht këtyre avantazheve të dukshme, mjediset natyrore nuk lejojnë kërkime të specializuara me shtame specifike bakteriale.
- Medium sintetik. Ato ndryshojnë në atë që përbërja e tyre kimike njihet në raportet e sakta të të gjithë përbërësve. Mjete të tilla përgatiten për një kulturë specifike të baktereve, metabolizmi i të cilave dihet paraprakisht për studiuesin. Në fakt, për këtë arsye, është e mundur të përgatitet një mjedis i tillë sintetik për zhvillimin e mikroorganizmave. Ato përdoren për të analizuar aktivitetin jetësor të baktereve. Për shembull, mund të zbuloni se çfarë substancash lëshojnë në mjedis dhe sa. Mikroorganizmat do të rriten gjithashtu në mjediset natyrore, por është e pamundur të gjurmohen ndonjë ndryshim sasior në përbërje për shkak të mosnjohjes së përmasave fillestare të substancave.
Diferencial-mjedise diagnostikuese
Në punën me bakteret, mund të përdoren jo vetëm lëndë ushqyese të zakonshme. Mikrobiologjia është një shkencë e gjerë, dhe për këtë arsye, gjatë kryerjes së një studimi, ndonjëherë është e nevojshme të bëhet një përzgjedhje e mikroorganizmave për ndonjë arsye. Përdorimi i mjeteve diagnostikuese diferenciale në laborator bën të mundur përzgjedhjen e kolonive bakteriale të dëshiruara në një enë Petri sipas shenjës biokimike të aktivitetit të tyre jetësor.
Përbërja e mjediseve të tilla përfshin gjithmonë komponentët e mëposhtëm:
1. Ushqyes për rritjen e qelizave.
2. Substrati (substanca) e analizuar.
3. Një tregues që do të japë një ngjyrë karakteristike kur ndodh një reagim i caktuar.
Një shembull është mediumi ushqyes diferencial diagnostikues "Endo". Përdoret për të zgjedhur kolonitë e baktereve që mund të shpërbëjnë laktozën. Fillimisht, ky medium ka një ngjyrë rozë. Nëse një koloni mikroorganizmash nuk është në gjendje të shpërbëjë laktozën, ajo merr ngjyrën e zakonshme të bardhë. Nëse bakteret mund ta zbërthejnë këtë substrat, ato kthehen në një ngjyrë karakteristike të kuqe të ndezur.
Të mërkurat me zgjedhje
Laboratorët diagnostikues shpesh punojnë me shtupa që përmbajnë shumë lloje të ndryshme bakteresh. Natyrisht, për punë cilësore, është e nevojshme të zgjedhim disi kolonitë që na duhen nga dhjetëra të huaj. Këtu mund të ndihmojë një medium i rritjes bakteriale, i cili është formuluar në mënyrë ideale për të mbështetur vetëm një lloj mikroorganizmi.
Për shembull,një mjedis i tillë zgjedhor është i përshtatshëm vetëm për riprodhimin e Escherichia coli. Pastaj, nga mbjellja e shumë baktereve në një pjatë Petri, do të shohim vetëm koloni të së njëjtës Escherichia coli dhe jo më shumë. Para fillimit të punës, është e nevojshme të njihet mirë metabolizmi i bakterit të studiuar për ta përzgjedhur me sukses nga një përzierje e specieve të tjera.
Mjete kulture të ngurtë, gjysmë të ngurtë dhe të lëngët
Bakteret mund të rriten jo vetëm në nënshtresa të ngurta. Mjetet ushqyese ndryshojnë nga njëra-tjetra në gjendjen e tyre të grumbullimit, e cila varet nga përbërja gjatë prodhimit. Fillimisht, të gjitha kanë një konsistencë të lëngshme dhe kur shtohet xhelatinë ose agar në një përqindje të caktuar, përzierja ngurtësohet.
Mjetet e kulturës së lëngshme zakonisht gjenden në epruveta. Nëse është e nevojshme të rriten bakteret në kushte të tilla, shtoni një zgjidhje me një kampion kulture dhe prisni 2-3 ditë. Rezultati mund të ndryshojë: formohet një precipitat, shfaqet një film, notat e vogla notojnë ose formohet një tretësirë e turbullt.
Mjeti i dendur i kulturës përdoret shpesh në kërkimet mikrobiologjike për të studiuar vetitë e kolonive bakteriale. Mjete të tilla janë gjithmonë transparente ose të tejdukshme në mënyrë që të jetë e mundur të përcaktohet saktë ngjyra dhe forma e kulturës së mikroorganizmave.
Përgatitja për media
Substrate të tilla si përzierjet e mishit-peptonit të bazuar në lëng mishi, xhelatinë ose agar janë shumë të lehta për t'u përgatitur. Nëse keni nevojë të bëni një substrat të ngurtë ose gjysmë të lëngshëm, në një lëngshtoni përkatësisht 2-3% ose 0, 2-0, 3% xhelatinë ose agar. Ato luajnë një rol të madh në ngurtësimin e përzierjes, por nuk janë burim lëndësh ushqyese. Kështu, përftohen mjedise ushqyese që janë të përshtatshme për rritjen e një kulture bakteriale.
