Ky artikull do t'i kushtohet fenomenit të reaksionit të reshjeve. Këtu do të shqyrtojmë veçoritë e formulimit të këtij fenomeni, fenomenin e difuzionit, karakteristikat e përgjithshme, rolin në jetën e njeriut dhe shumë të tjera.
Hyrje në fenomenin
Precipitimi është një fenomen i tipit serologjik, gjatë të cilit antigjenet e tretshëm ndërveprojnë me antitrupat dhe si rrjedhojë vërehet precipitim - një precipitat.
Karakteristika e përgjithshme e reaksionit të precipitimit është një formë ndikimi i koordinuar i antigjenit dhe antitrupave. Këto lloj ndërveprimesh bëjnë të mundur përcaktimin e pranisë së antigjeneve të panjohur në substancën e provës duke shtuar antitrupa dhe antigjenë të njohur. Procesi i reshjeve pa praninë e kripërave do të vazhdojë më keq, dhe optimali më i mirë qëndron brenda intervalit 7,0-7,4 pH.
Përbërësit e një reaksioni
Ka tre elementë kryesorë midis përbërësve të reaksionit të reshjeve:
- Një antigjen që ka një natyrë molekulare. Është në gjendje të tipit fine, me fjalë të tjerai tretshëm. Gjithashtu, një antigjen i tillë quhet precipitogen, i cili është një lizatë ose ekstrakt indi, etj. Një precipitogen ka një ndryshim karakteristik nga një aglutinogen, i cili qëndron në madhësinë e grimcave nga të cilat përbëhet. Aglutinogeni ka një madhësi qelizore të natyrshme dhe precipitogenët janë në përpjesëtim me madhësinë e molekulës. Zgjidhja e antigjenit karakterizohet nga transparenca.
- Një antitrup i gjetur në serumin e gjakut të njeriut, si dhe në serumin diagnostikues imunitar, i cili përmban antitrupat e studiuar.
- Elektrolitet janë tretësira të klorurit të natriumit që janë izotonike.
prodhimi i precipitogen
Krijimi i një reaksioni precipitimi është i pamundur pa një precipitogen, i cili përftohet nga bluarja e materialeve dhe nxjerrja e antigjeneve proteinike prej tyre. Nxjerrja ndodh me zierje ose me metoda të tjera.
Lizatet, si dhe ekstraktet e indeve dhe organeve, serumi i gjakut, lloje të ndryshme filtratesh të bazuara në kulturat e lëngut mikrobik, si dhe ekstrakti i kripës së mikroorganizmave dhe substancave autolizuese, janë të habitshme. shembull i precipitogjenëve.
Konfigurimi në reshje
Tani le të shqyrtojmë metodën e konfigurimit të reaksionit të precipitimit.
Kryhet një reaksion unazë-precipitimi, i cili zhvillohet në epruveta të përgatitura posaçërisht. Serumi futet në zgavrën e enëve, duke e derdhur mbi mur me ndihmën e një grykë pipete. Më pas, sasia e duhur e precipitatorit vendoset me kujdes sipër, dhe më pas tubi sillet në një pozicion vertikal nga ai horizontal. Vendosja dhe marrja parasysh e reagimit të reshjeve është një operacion shumë i përpiktë. Rezultati regjistrohet pas shfaqjes së një unaze të bardhë në kufirin midis antigjenit dhe antitrupit. Nëse elementët reagues të reaksionit korrespondojnë me njëri-tjetrin, atëherë ato lidhen, por kjo bëhet e dukshme pas një periudhe të gjatë kohore të ndërveprimit të tyre.
Reaksioni i precipitimit kryhet edhe në një enë Petri ose në një gotë rrëshqitje, ku transferohet xhel agar, duke e aplikuar në një shtresë të vogël. Pasi të ngurtësohet në xhel, priten një numër i vogël pusesh në të cilat do të vendosen antigjenet dhe antitrupat. Ekzistojnë dy mënyra për të kryer këtë veprim: metoda e imunodifuzionit radial dhe imunodifuzioni i dyfishtë.
Informacion i përgjithshëm
Mekanika e punës së reshjeve është e ngjashme me pajisjen e aglutinimit. Nën ndikimin e serumit të tipit imunitar, antigjeni, i cili tashmë ka hyrë në reaksion, zvogëlon shkallën e shpërndarjes së tij. Një kusht i rëndësishëm është transparenca e serumit dhe e antigjenit.
Ju mund të përmirësoni regjistrimin e reaksionit nëse mbivendosni antigjene mbi antitrupat. Si rezultat, mund të vërehet shfaqja e precipitateve në formën e një unaze. Ky fenomen quhet reshje unazore dhe kryhet në tuba të veçantë që kanë një diametër prej 2,5 deri në 3,5 mm. Një nga shembujt më të zakonshëm të një reaksioni precipitimi është diagnoza e antraksit.
Reshjet bën të mundur përcaktimin e nivelit të toksigjenitetit të një kulture difterike në agar.
Gjatë reagimit në shqyrtimndodh precipitimi i komplekseve antigjenike dhe antitrupave. Reshjet janë një fenomen imunologjik që ju lejon të përcaktoni sasinë e antitrupave në serumin e gjakut të një personi dhe kafshësh të sëmurë ose të vaksinuar.
Pasoja e titrimit
Është e rëndësishme të dini se të dhënat e marra nga titrimi i metodës së mësipërme nuk janë të matshme. Për të krijuar dhe analizuar një vlerësim sasior të numrit të përmbajtur të antitrupave, u zhvillua një teknikë e veçantë reagimi nga M. Heidelberger dhe E. Kabat, e cila bazohet në kërkimin dhe identifikimin e zonës së ekuivalencës. Përzierja e numrit të moshës së antigjeneve me një vëllim konstant të antiserumit çon në një rritje të precipitatit të formuar fillimisht, dhe pastaj përsëri zvogëlohet për shkak të një rritje të aftësisë për të shpërndarë komplekset e antigjenit. Duke përcaktuar sasinë e antitrupave në supernatantët që përmbahen në çdo tub, mund të zbuloni se një numri të caktuar enësh me antitrupa do t'i mungojë lëngu. Këtu, në krahasim me epruvetat e tjera, do të formohet precipitati më i madh. Për shkak të kësaj dhe zbritjes së precipitatit të proteinës antigjenike nga vlera totale e proteinave, është e mundur të merret vlera e saktë e antitrupave që përmbahen në vëllimin e serumit specifik që studiohet. Më tej, sasia e molekulave të proteinave të precipitatit përcaktohet nga sasia e azotit ose duke përdorur metoda kolorimetrike.
Vlerësimi i vlerave
Përllogaritja e vlerave të reshjeve në metodologjinë diagnostike duhet të marrë parasysh mundësinë e pranisë në serumin imunitar të një antitrupi që nuk ka vetinë e precipitinës, nga e cila rrjedh se vetë precipitati mund të mos jetë formohet pas reaksionit me antigjenet. Lista e molekulave të tilla përfshin antitrupa jo të plotë dhe disa lloje nga grupi i globulinave gama-A.
Reaksioni i reshjeve në kushte laboratorike gjen aplikimin e tij në lloje të ndryshme modifikimesh. Për shembull, reaksioni i termoprecipitimit përdoret për të zbuluar antigjenet bakteriale të botulizmit, antraksit etj., të cilët nuk i nënshtrohen denatyrimit termik. Ndryshe nga precipitimi unazor, ky lloj reaksioni përdor filtrate të materialit në fjalë në gjendje të zier.
Analiza e reaksionit të precipitimit në një përzierje komplekse nuk lejon që të karakterizohen vetitë e elementeve individuale të përzierjes. Në raste të tilla, një person përdor metodën e reshjeve në agar dhe gjithashtu përdor imunoelektrofereza.
Reshje difuze
Në këtë fushë të kërkimit, ekziston koncepti i një reaksioni difuz të reshjeve (RPD). Ai bazohet në aftësinë për t'u shpërndarë në xhel të antitrupave dhe antigjeneve të tretshëm. Difuzioni është aftësia e një molekule të një lënde të caktuar për të depërtuar në molekulat e një tjetre, e cila shkaktohet nga lëvizja termike.
Xhel është një sistem i tipit të shpërndarë në të cilin faza e lëngshme shpërndahet në mënyrë të barabartë në fazën e ngurtë. Më shpesh, xhel agar përdoret për një reagim të tillë.
Pas dhënies së parametrave, nëkushtet në të cilat molekulat mund të shpërndahen në lidhje me njëra-tjetrën, takimi i tyre do të shoqërohet me formimin e një kompleksi antigjen + antitrupa. Një neoplazmë e tillë është në gjendje të shpërndahet, duke qenë në vetë xhel, dhe do të precipitojë, duke marrë formën e një shiriti që mund të zbulohet me sy të lirë. Nëse antigjeni dhe antitrupi janë homologë, nuk do të formohet asnjë brez.
Krijimi i kushteve në të cilat do të ndodhë difuzioni në shtresën e agarit përfshin derdhjen e komponentëve, por numri i përgjithshëm i puseve dhe pozicioni i tyre relativ përcaktohet nga vendos llojin e detyrës që kërkohet. RPD i jep një personi aftësinë për të zbuluar dhe identifikuar viruse të panjohura të izoluara duke testuar duke përdorur serumet e njohura të antitrupave.
Aplikacion
Reshjet përdoren gjerësisht jo vetëm në diagnostikimin e sëmundjeve, por gjen zbatim edhe në ekzaminimin mjekoligjor. Është e vështirë të imagjinohet një analizë në të cilën është e mundur të përcaktohet lloji i gjakut, pjesë e një organi ose indi që gjendet në një armë krimi që nuk përdor reaksionin e reshjeve. Gjatë këtij procesi përdoren serumet precipituese, të cilat përftohen nga imunizimi i kafshëve dhe shpendëve të ndryshëm. Është e rëndësishme që niveli i titrit të serumit të mos jetë më i vogël se 1:10000, si dhe duhet të ketë specifikë të mjaftueshme. Nga pika e zbuluar e gjakut ose korja e tij, bëhet një ekstrakt për fizik. zgjidhje, e cila do të ekspozohet më tejserum precipitues. Sipas këtij reagimi, është e mundur të përcaktohen llojet e proteinave të indeve dhe organeve si të njerëzve ashtu edhe të kafshëve. Marrja e ekstrakteve me re e detyron njeriun të përdorë reshjet në agar.
Përfundime
Duke analizuar informacionin e lexuar, mund të konkludojmë se reagimet e reshjeve janë jashtëzakonisht të rëndësishme për një person, pasi ato lejojnë diagnostikimin e antigjeneve të ndryshëm duke përdorur antitrupa, ky fenomen përdoret gjithashtu gjerësisht në ekzaminimin mjeko-ligjor dhe ju lejon të identifikoni llojin e gjaku, indi ose organi në lidhje me një subjekt të caktuar. Ekzistojnë disa lloje dhe metoda të reshjeve, të cilat përdoren në përputhje me nevojat e shfaqura të problemit që zgjidhet.
