Larmia e infeksioneve bakteriale kërkon një identifikim të qartë të patogjenit dhe përcaktimin e specieve të tij. Për të përcaktuar llojin e mikroorganizmit, mikrobiologët ndihmohen nga vetitë e tij tinktorale - ndjeshmëria e mikrobit ndaj ngjyrosjes me ngjyra të ndryshme. Kjo metodë ju lejon të eksploroni morfologjinë e patogjenit. Vetitë tinktoriale të baktereve kanë një rëndësi të madhe për kërkimet praktike dhe teorike në fushën e mikrobiologjisë.
Kërkim mikrobial
Në bakteriologji, ka shumë metoda për ngjyrosjen e mikroorganizmave. Të gjitha ato bazohen në vetitë tinktorale të baktereve. Ngjyrosja ju lejon të përcaktoni formën, strukturën, madhësinë, pozicionin relativ. Kjo mundëson zgjidhjen e problemeve të sistematizimit të llojeve të mikroorganizmave të biologjisë së përgjithshme dhe mikrobiologjisë krahasuese.
Pse i lyeni ato
Bakteret janë praktikishtorganizma transparentë, dhe pa përdorimin e ngjyrosjes, ato janë dobët të dukshme për mikroskopin konvencional. Ju mund të përdorni lloje të veçanta të mikroskopisë (kontrasti i fazës, fushë e errët) për të studiuar objektet, por mënyra më e lehtë është të ngjyrosni, pas së cilës bakteret bëhen të dukshme në një mikroskop konvencional me dritë.
Përgatitja e mostrës
Pavarësisht nga teknika e ngjyrosjes së përdorur, ekzistojnë rregulla uniforme për përgatitjen e objektit në studim. Fazat e mëposhtme janë të detyrueshme:
- Instrumentet sterile bëjnë një njollë në një rrëshqitës xhami.
- Mostra është duke u tharë. Kjo bëhet në temperaturën e dhomës ose duke përdorur kabinete tharjeje.
- Ndiqet nga faza e fiksimit - mikroorganizmat ngjiten në gotë me përbërës të veçantë.
- Ngjyrosje e duhur - kampioni mbulohet me bojë për një periudhë të caktuar kohe, pas së cilës ajo lahet.
- Tharrje përfundimtare - kampioni thahet përsëri.
Ngjyrat më të zakonshme
Ngjyrat më të përdorura bazohen në anilinë me vlera të ndryshme acidi (pH). Shumica e ngjyrave janë pluhur që janë të holluar në alkool.
Ngjyrat në të cilat kationet janë agjentët ngjyrues quhen bazë (pH më i madh se 7). Ato mund të përdoren për ngjyrosjen e mikroorganizmave në ngjyrat e kuqe (magenta, safranin), vjollce (vjollcë metil, thionine), blu (blu metilen), jeshile (e gjelbër malakit), kafe (krizoidinë) dhe e zezë (indulin).
Ngjyrat, në të cilat agjentët ngjyrues janë anione, quhen acide (pH më pak se 7). Ata do ta njollosin kampionin me ngjyrë të kuqe (eozinë), të verdhë (pikrinë) ose të zezë (nigrosinë).
Ekziston një grup ngjyrash neutrale (për shembull, rodamina B), ku si kationet ashtu edhe anionet veprojnë si agjentë ngjyrosës.
Kultura e vdekur ose e gjallë
Metodat e ngjyrosjes ndahen në dy grupe sipas formës së jetës së kampionit të provës.
- Ngjyrosje vitale (gjatë gjithë jetës). Kjo metodë e studimit të vetive të mikroorganizmave përdoret në studimin e indeve të gjalla, gjë që bën të mundur vëzhgimin e proceseve jetësore të mikrobeve. Për këtë ngjyrosje përdoren bojëra me toksicitet të ulët dhe fuqi depërtuese të lartë.
- Ngjyrosje post-vitale. Kjo është njollosja e mikroorganizmave të vdekur ose të vrarë. Falë vetive tinktorale të baktereve, mikrobiologët përcaktojnë strukturën e tyre. Është kjo ngjyrosje që përdoret më gjerësisht.
Gram-pozitive dhe gram-negative
Janë këto karakteristika të baktereve që mund të gjenden në udhëzimet për ilaçe të ndryshme. Kjo metodë e studimit të vetive tinktoriale të baktereve bazohet në përdorimin e ngjyrës violet gentian dhe fiksimit të jodit. Kjo është teknika e Hans Christian Gram, një mjek danez që e propozoi atë në 1884. Si rezultat i kësaj ngjyrosjeje, bakteret ndahen në dy grupe:
- Gram (+) - bëhet blu(stafilokokët dhe streptokoket).
- Gram (-) - njolla rozë në të kuqe (enterobakteret, salmonela, E. coli).
Rezultatet e ndryshme të ngjyrosjes janë për shkak të vetive të ndryshme ngjyrosëse të mureve bakteriale. Metoda e ngjyrosjes Gram është ende kryesore në diagnostikimin e disa sëmundjeve infektive.
Teknika të tjera ngjyrosje
Le të karakterizojmë disa metoda të tjera të përdorura gjerësisht në bakteriologji.
Metoda
Sporet mund të shihen
Ngjyrosja me fuchcin e Tsiel ju lejon të shihni spore bakteriale. Duke pasur një ngjyrë rozë pas ngjyrosjes, ato janë qartë të dukshme në sfondin e baktereve blu. Kjo metodë është gjithashtu një mjet i bakteriologjisë dhe ka një rëndësi të madhe praktike.
